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毛细管电泳仪工作原理
毛细管电泳是一种以弹性石英毛细管为分离通道,以高压直流电场为驱动力,根据样品中各组分迁移率和分布行为的差异,实现分离的电泳分离分析方法。
使用的设备
电源:有0~30kV可调电压和稳压电源,内径小于100μm(常用50~75μm),长度一般为30~100cm弹性石英毛细管、电极槽、检测器和取样装置。
检测器有:紫外、可见光谱检测器、激光诱导荧光检测器和电化学检测器,其中z常用的是紫外检测器。
取样方法有:电动法(电迁移)、压力法(正压、负压)和虹吸法。
整套仪器还配备了自动冲洗、自动取样、温度控制、数据采集和处理等部件。
毛细管电泳产生的电泳原理:
用于毛细管电泳的石英毛细管柱,当pH值大于3时,内表面带负电,与缓冲液接触形成双电层。形成双电层一侧的缓冲液带正电,向负极移动,形成电渗流。同时,在缓冲溶液中,在电场的作用下,带电粒子以不同的速度向与带电极性相反的方向运动,形成电泳。带电粒子在毛细管缓冲液中的迁移速度等于电泳流和电渗流的矢量和。各种粒子由于所携带的电荷量、质量、体积、形状等因素造成的迁移速度不同而被分离。